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液相色譜柱怎麼裝填和活化↟│✘?

釋出時間✘₪╃☁:2022-09-23   點選次數✘₪╃☁:130次
  液相色譜柱是由具有光學活性的單體☁╃,固定在矽膠或其它聚合物上製成手性固定相☁╃,透過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特徵的差異☁╃,從而達到光學異構體拆分的目的·│✘╃。
 
  在手性拆分中☁╃,溫度的影響是很顯著的·│✘╃。低溫增加手性識別能力☁╃,但可能引起色譜峰變寬而導致分離變差·│✘╃。因此確定手性分析方法過程中要考慮柱溫的影響☁╃,確定柱溫·│✘╃。
 
  要實現手性識別☁╃,手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用·│✘╃。這種相互作用包括氫鍵▩▩•、偶級-偶級作用▩▩•、π-π作用▩▩•、靜電作用▩▩•、疏水作用或空間作用·│✘╃。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果·│✘╃。
 
  這些相互作用透過影響包埋複合物的形成☁╃,特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果·│✘╃。由於這種作用力較微弱☁╃,因此需要仔細調節▩▩•、最佳化流動相和溫度以達到分離效果·│✘╃。
 
  液相色譜柱裝填實際上是有一定技巧和程式☁╃,可能還有一些運氣·│✘╃。一般使用高壓勻漿方法裝填·│✘╃。也就是能讓填料在溶劑內均勻地懸浮·│✘╃。然後用瞬間高壓壓實☁╃,這實際上用到了不同比例的勻漿液體☁╃,和合適的壓力·│✘╃。壓力太大☁╃,顆粒破碎☁╃,壓力太小☁╃,塔板數少·│✘╃。同時壓力需要穩定☁╃,不然分佈不均☁╃,拖尾嚴重·│✘╃。同時還有頭上平整程度·│✘╃。套上套☁╃,就可以用了·│✘╃。
 
  新柱活化☁╃,實際上是一個平衡的過程☁╃,除了用流動相平衡外☁╃,有時候還要用所測樣品對新柱進行平衡☁╃,特別是測定分子量比較高的多肽☁╃,尤其重要·│✘╃。因為分子量高的物質分子☁╃,擴散速度慢☁╃,平衡所需時間也相應較長·│✘╃。具體平衡方式也很簡單☁╃,多進幾次樣品☁╃,直到峰面積和保留時間穩定☁╃,再進行正式進樣測定·│✘╃。
 

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