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液相色譜柱的柱長及內徑的選擇要點分享

釋出時間₪│◕·:2022-08-18   點選次數₪│◕·:218次
  液相色譜柱在使用前│◕↟,要進行柱的效能測試│◕↟,並將結果儲存起來│◕↟,作為評價柱效能變化的參考╃◕☁。在做柱效能測試時要按照出廠報告中的條件進行│◕↟,只有這樣│◕↟,測得的結果才有可比性╃◕☁。
 
  液相色譜柱的柱長及內徑的選擇₪│◕·:
 
  長度的選擇₪│◕·:柱越長│◕↟,總柱效越高(n值越大)│◕↟,柱越長│◕↟,分析時間也越長╃◕☁。250—300mm是普遍的柱長│◕↟,實驗室一半以上的工作都是採用此規格柱子│◕↟,一般用來分離l0到50個組份的中等至複雜混合物;500—600mm│◕↟,要求較高解析度的應用│◕↟,—般用來分離大於50個組份或包含有難分離物質的複雜樣品程序升溫分析╃◕☁。
 
  內徑₪│◕·:柱效率與柱半徑平方成反比│◕↟,內徑越小柱效越高│◕↟,但內徑越大│◕↟,柱容量也增加│◕↟,允許進樣量就越多╃◕☁。當進樣量超過柱容量時│◕↟,則因柱內每塊理論板內不能建立真正的平衡│◕↟,將會導致色譜蜂畸變│◕↟,柱解析度降低│◕↟,重現性不好╃◕☁。因此對於複雜樣品需要準確分離│◕↟,必須使用小內徑柱子╃◕☁。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物│◕↟,為了增加樣品容量就必須使用內徑大的柱子│◕↟,目前實驗室使用常見的柱子內徑一般是4.6mm╃◕☁。
 
  一般選擇原則₪│◕·:分析大分子量化合物選擇大孔徑;對於高pH值或者鹼性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱│◕↟,以改善峰形│◕↟,延長使用壽命等╃◕☁。
 
  現在商品化的液相色譜柱琳琅滿目│◕↟,根據引數可以給我們提供一個初步的選擇│◕↟,但由於各個儀器廠商的填料技術和鍵合技術都有差異│◕↟,即使都是C18柱│◕↟,同一品牌不同系列都有不同的功能│◕↟,有能耐受低pH值的│╃、有耐高溫的│╃、有適合鹼性樣品的等等╃◕☁。所以在選擇前要好好研究引數│◕↟,仔細閱讀說明書│◕↟,才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法╃◕☁。
 

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